人β干扰素-血清白蛋白融合蛋白在毕赤酵母中的分泌表达
利用重叠PCR技术在体外拼接IFNβ和HSA基因,将得到的融合基因插入到毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K中,置于启动子AOX1和α交配因子信号肽的作用下,分泌表达融合蛋白IFNβ-HSA.重组质粒pPIC9K-IFNβ-HSA经SalI线性化,电击转化毕赤酵母KM71,经G418筛选得到高拷贝转化子.PCR鉴定后,用甲醇诱导表达,SDS-PAGE和Westernblot分析表达的融合蛋白IFNβ-HSA表明该蛋白分子量约为90kDa且具有HSA的抗原性;用细胞病变抑制法测定发酵液上清中融合蛋白的干扰素活性约为640IU/mL.
干扰素 毕赤酵母 融合蛋白 血清白蛋白 分泌表达
雷楗勇 张莲芬 杨健良 金坚
江南大学生物工程学院教育部工业微生物重点实验室,无锡,214036
国内会议
北京
中文
151-159
2006-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）