草莓FabHLH3基因克隆表达分析与过量和干涉表达载体构建
以八倍体凤梨草莓栽培品种”越心”(Fragaria×ananassa cv.Yuexin)为试材,利用RT-PCR技术从果实中克隆出FabHLH3基因全长编码序列,运用生物学软件对该序列进行相关生物信息学分析,同时采用实时荧光定量PCR方法对FabHLH3基因在不同组织、不同发育阶段果实及不同光质处理下的表达模式进行研究.测序和分析结果表明,FabHLH3基因的CDS全长2094bp,编码697个氨基酸残基,该蛋白质理论分子量约为77.43kD、等电点(pI)为6.05;经软件DNAMAN分析,核苷酸序列和氨基酸序列与二倍体森林草莓(F.vesca)的FvbHLH3基因的一致性为92.04％和90.87％.利用实时荧光定量PCR检测FabHLH3基因在叶、叶柄、花和果实中的表达情况,发现在叶中的表达量最高,随着果实发育FabHLH3基因表达量逐渐增加,在半红期达到最高,红果期开始下降.此外,FabHLH3基因的表达还受到红光和蓝光的诱导.用无缝克隆技术构建了FabHLH3基因的过量表达载体pGreen-FabHLH3和干涉表达载体pGreen-FabHLH3i,为进一步验证FabHL H3基因的功能奠定了基础.
草莓 遗传育种 FabHLH3基因 基因克隆 过量表达载体 干涉表达载体
苗立祥 张青 张豫超 杨肖芳 蒋桂华
浙江省农业科学院园艺研究所,杭州310021 临安市农林技术推广中心,临安311300
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2017-02-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）