HSD3B2通过甾类激素合成通路调控鸡ESCs 向雄性生殖细胞分化
精原干细胞可以替代胚胎干细胞进行基因治疗和遗传操作而不涉及伦理道德,目前被广泛的应用和研究,但是对精原干细胞形成过程中具体的调控方式却少有研究. 目的：本研究旨在探索甾类激素合成通路在鸡雄性生殖细胞分化过程中的作用,为构建鸡雄性生殖细胞分化调控网络提供理论依据. 方法：体外RA诱导生殖细胞分化模型中分别对HSD3B2进行干扰和过表达处理,荧光倒置显微镜观察不同处理组在诱导过程中细胞形态变化;并通过荧光定量PCR,间接免疫荧光,流式细胞分选方法检测雄性生殖细胞在不同分组中标记基因的表达和形成情况.同时在鸡胚正常孵化过程中通过胚盘注射方法对HSD3B2进行干扰和过表达处理研究甾类激素合成通路在鸡雄性生殖细胞分化过程中的作用. 结果：体外诱导模型中,干扰HSD3B2能够显著降低下游基因CYP1A1、UGT1A1和HSD17B7表达(P＜0.01),抑制甾类激素合成通路,过表达则出现相反结果;激活甾类激素合成通路能够促进SSC-like细胞生成,Cvh、Stra8、intergrinα6等生殖标记基因表达量显著上调(P＜0.01),intergrinα6+细胞率(7.39％±0.224)显著多于对照组(4.20％±0.235),反之,则抑制SSC-like形成;鸡胚盘注射实验中,激活甾类激素合成通路,与对照组相比显著提高Cvh、Stra8、intergrinα6等生殖标记基因表达量(P＜0.01),孵化18.5d后,intergrinα6+细胞率(46.6±0.360)显著的高于对照组(44％±0.343);反之,则出现相反的结果. 结论：本研究实验结果表明HSD3B2基因调节甾类激素合成通路信号转导,正向调节鸡雄性生殖细胞分化.
鸡胚胎干细胞 雄性生殖细胞 细胞分化 甾类激素
张晨 王曼 何娜娜 汪怡临 赵瑞丰 余昕健 金晶 左其生 张亚妮 李碧春
扬州大学动物科学与技术学院,江苏省动物繁育与分子设计重点实验室,江苏扬州 225009
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2017-12-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）