碱性果胶酶PEL168的分子改造和在生物煮练中的应用
本研究基于对PEL 168的结构分析，分别从增加盐桥，增加二硫键、增加局部结构的柔韧性等方面进行理性设计提高PEL168的比酶活和稳定性，但是大部分设计都造成了酶活的降低或者完全失活，只得到了一个比酶活提高1.32倍，pH稳定性提高的突变体V 132E。因此采用随机突变进行改造，利用error-prone PCR建立突变体文库，通过果胶底物平板初筛和%孔板复筛得到一个比酶活提高1.81倍的突变体K47E(640U/mg)，在50℃时的半衰期也延长至4.5h。鉴于有利突变的累积效应，将突变位点V 132E和K47E进行组合，得到双突变体K47E/V 132E，其比酶活提高至873U/mg。
碱性果胶酶 结构分析 理性设计 比酶活 稳定性能
望潇文 卢争辉 Jonathan Nimal Selvaraj 蒋思婧 易犁 张桂敏
生物催化技术湖北省工程实验室,湖北大学,武汉 430062
国内会议
武汉
中文
238-238
2017-10-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）