转人DPP4的转基因小鼠模型的构建与鉴定
目的：制备携带有人源DPP4基因(hDPP4)的转基因小鼠,为中东呼吸综合征(Middle East Respiratory Syndrome.MERS)冠状病毒疫苗的研制和治病机制分析工作提供小动物模型. 方法：首先从体外培养的人类细胞系中克隆HDPP4cDNA序列,将其插入表达载体后构建重组质粒.随后利用原核注射法制备HDPP4转基因小鼠,繁育出F0代转基因小鼠.选取整合有HDPP4基因的F0代鼠与野生型鼠杂交繁殖获得F1代小鼠.PCR鉴定F1代转基因小鼠基因型,同时用RT-PCR和Western blotting方法检测HDPP4在转基因小鼠全身组织表达情况. 结果：共得到F0鼠4只.F1代转基因小鼠经Westernblotting和RT-PCR检测,HDPP4表达水平在心、肝、脾、肺、脑等组织中表达中均明显增高. 结论：成功构建HDPP4基因小鼠,并且能够稳定遗传.为后续的MERS疫苗评价相关工作奠定了基础.
中东呼吸综合征 致病机理 冠状病毒疫苗 动物模型
刘超 崔莹 李冰 谢英
河北省实验动物重点实验室,河北医科大学实验动物学部 吉林农业大学动物科学技术学院 河北省实验动物重点实验室,河北医科大学实验动物学部;北京协和医学院比较医学中心,中国医学科学院医学实验动物研究所;中国人民解放军军事兽医研究所动物病毒学研究室
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2017-09-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）