全柱成像毛细管等电聚焦(iCIEF)技术分析重组人IgG Fc-融合蛋白电荷异质性
目的:建立全柱成像毛细管等电聚焦(iCIEF)法分析重组人IgG Fc-融合蛋白的电荷异质性. 方法:首先对全柱成像毛细管等电聚焦方法在蛋白浓度、助溶剂、两性电解质、聚焦时间等方面进行了条件优化.并应用优化的方法进行Fc-融合蛋白的电荷异质性及等电点检测及重复性验证,并将结果与毛细管等电聚焦(cIEF)及平板胶等电聚焦(IEF)结果进行对比分析. 结果:在优化的实验条件下,分析Fc-融合蛋白的电荷异质性及等电点具有良好的分离度和重复性,分离效果明显好于cIEF和IEF,且主成分的pI重复测定RSD均小于0.5％. 结论:iCIEF作为一种新的技术手段用于重组蛋白类药物电荷异质性及等电点分析,方法快速、准确、重复性好,能够较好地检测高度糖基化的重组Fc-融合蛋白产品的电荷异质性,为保障Fc-融合蛋白类产品生产工艺的稳定性及质量控制提供了一种快速、可靠的分析方法.
重组人IgG Fc-融合蛋白 电荷异质性 全柱成像毛细管等电聚焦电泳 质量控制
刘振东 韩国华 杨勇 王庆民
齐鲁制药有限公司药物研究院,济南 250100
国内会议
辽宁本溪
中文
86-95
2017-07-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）