烟草牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶基因NtGGPPS1的克隆和功能分析
为进一步明确烟草牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶基因NtGGPPS1的功能,根据已公布的普通烟草(Nicotiana tabacum)GGPPS1基因编码区序列设计特异性引物,从普通烟草K326中克隆到NtGGPPS1基因.构建荧光表达载体PFF19-NtGGPPS1-GFP,对NtGGPPS1基因进行亚细胞定位研究.通过荧光定量PCR分析了普通烟草K326在不同激素处理下NtGGPPS1基因的表达量变化.构建NtGGPPS1基因的RNAi载体pHellsgate2-NtGGPPS1,通过农杆菌浸染烟草K326后获得NtGGPPS1基因显著下调的烟株,检测了烟株中质体色素含量的变化情况.结果表明:NtGGPPS1融合蛋白基因的绿色荧光分布在烟草BY-2细胞的质体上,表明该基因定位于质体.茉莉酸甲酯(MeJA)处理烟草后,NtGGPPS1基因的表达量显著升高,而生长素(IAA)处理后,该基因的表达量下降.与对照相比,在NtGGPPS1基因下调的烟株中其质体色素含量均显著降低,预示NtGGPPS1参与了烟草β-胡萝卜素的生物合成.
烟草 牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶 基因克隆 β-胡萝卜素 生物合成
魏攀 孟利军 陈千思 刘萍萍 谢小东 王燃 武明珠 张剑锋 魏春阳 杨军 林福呈 李锋
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2017-11-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)