手工克隆方法生产转植酸酶基因猪的研究
目的:构建广西巴马小型猪p-PSP-Intron-Cafp载体并生产转植酸酶基因的猪. 方法:根据GenBank上登录的猪腮腺分泌蛋白(PSP)基因序列设计合成一对特异性引物,利用PCR技术扩增广西巴马小型猪的PSP基因启动子序列,并与连有Cafp基因的重组质粒进行酶切、连接、转化,构建p-PSP-Intron-Cafp载体,利用电转方法将p-PSP-Intron-Cafp载体转入胎猪成纤维细胞中,通过荧光观察及细胞PCR鉴定的方法,证明转染成功.再将此细胞用于手工克隆的供体,生产转植酸酶基因环保猪,并进行鉴定. 结果:成功构建了p-PSP-Intron-Cafp载体,并验证其在细胞中成功表达,并生产转植酸酶基因的猪. 结论:成功获得转植酸酶基因猪.
转基因猪 手工克隆 植酸酶基因 成纤维细胞 PCR鉴定
张名媛 陈晓亮 高杰 陈时锦 齐丽娜 郭晓萍 黄玥萌 韦玲静 陈宝剑 吴延军 陈秋明 蒋钦杨 郭亚芬 韦英明 林秀坤 兰干球 蒋和生
广西医科大学;广西大学 中国农科院;大同大学 中国农科院 广西大学
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403-411
2017-12-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）