小肠结肠炎耶尔森氏菌、假结核耶尔森氏菌、志贺氏菌和空肠弯曲菌多重PCR方法的建立
目的:为实验动物微生物检测提供一种简便、灵敏、快速,并且特异性强的小肠结肠炎耶尔森氏菌、假结核耶尔森氏菌、志贺氏菌和空肠弯曲菌多重PCR检测方法. 方法:根据小肠结肠炎耶尔森氏菌fox基因、假结核耶尔森氏菌inv基因、志贺氏菌ipaH基因及空肠弯曲菌gyrA基因设计并筛选出特异性引物;优化退火温度等条件,分析多重PCR的特异性、敏感性,使用该多重PCR方法检测小鼠和豚鼠样品. 结果:多重PCR扩增出了预计的PCR产物,即小肠结肠炎耶尔森氏菌(511bp)、假结核耶尔森氏菌(779bp)、志贺氏菌(290bp)和空肠弯曲菌(156bp).该方法的灵敏度为1×10-3ng/μL(小肠结肠炎耶尔森氏菌、假结核耶尔森氏菌、志贺氏菌)和1×10-2ng/μL(空肠弯曲菌).特异性检测未从其他菌中检测出阳性条带.使用该方法从样品中检测出不等的阳性样品数. 结论:该多重PCR方法在实验动物微生物检测具有很好的应用和开发前景.
实验动物 小肠结肠炎耶尔森氏菌 假结核耶尔森氏菌 志贺菌 空肠弯曲菌 多重PCR检测
冯育芳 邢进 岳秉飞 贺争鸣
中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所,北京 100050
国内会议
呼和浩特
中文
122-127
2017-09-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)