丙烯腈对大鼠星形胶质细胞硫化氢合成酶的影响研究
目的:观察丙烯腈(AN)对原代大鼠星形胶质细胞内源性H2S合成酶的影响,初步探索气体信号分子硫化氢(H2S)在AN神经毒性中的作用. 方法:原代培养大鼠星形胶质细胞(AST),以不同浓度AN(0、1、2.5、5和10mmol/L)处理不同时间(6、12、24h),采用MTT法检测细胞活力,LDH漏出率检测细胞毒性;选取不同浓度AN(0、1、2.5、5和10mmol/L)作用12h,采用蛋白免疫印记法检测关键H2S合成酶”胱硫醚β-合酶(CBS)和3-巯基丙酮酸硫基转移酶(3-MST)”蛋白表达变化;分别采用H2S合成酶抑制剂干预和基因敲减的方法下调内源性H2S合成酶表达以及CBS激活剂S-腺苷甲硫氨酸(SAM)上调内源性H2S合成酶表达,观察AN细胞毒性的变化;采用硫氢化钠(NaHS)作为外源性H2S供体预处理细胞,观察AN细胞毒性的变化. 结果:AN对原代大鼠星形胶质细胞具有浓度、时间依赖性细胞毒性;不同浓度AN处理细胞12h,H2S合成酶(CBS,3-MST)蛋白表达量皆呈浓度依赖性下降;采用H2S合成酶(CBS)的抑制剂AOAA和siRNA干扰合成酶(CBS,3-MST)表达,AN细胞毒性显著增强(P＜0.05);采用CBS激活剂SAM和外源性H2S供体预处理则显著改善AN的细胞毒性(P＜0.05). 结论:丙烯腈抑制原代大鼠星形胶质细胞内源性H2S合成酶表达,H2S合成通路的下调可能是AN神经毒性的关键机制,且上调H2S合成或补充外源性H2S可能成为治疗职业神经损伤的重要方向.
丙烯腈 硫化氢 神经毒性 星形胶质细胞 胱硫醚β-合酶
杨波波 赵文君 尹昌胜 周云 王苏华 李芳 邢光伟 陆荣柱
江苏大学医学院预防医学与卫生检验系,江苏镇江212013 江苏大学附属人民医院检验科,江苏镇江212013
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317-322
2017-11-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）