骨髓单个核细胞体外培养诱导分化为脂肪细胞
目的:体外培养骨髓单个核细胞(BMNCs),并观察其成脂肪细胞分化能力. 方法:脱臼处死1~2月龄雄性SD大鼠,无菌取股骨和胫骨骨髓制作细胞悬液,EBM-2(含20%FBS、15μg/ml ECGs)培养基差速贴壁法培养第三次贴壁细胞,传代扩增,3到5代细胞用于实验.流式细胞分析检测CD34、CD44、CD45、CD90、CD144(VE-cadherin)和血管内皮细胞生长因子受体-2(KDR)表达;STEMPRO Adipogenesis Differentiation Kit检测细胞成脂肪分化能力. 结果:通过差速贴壁法可以有效去除淋巴细胞、红细胞、骨髓间充质干细胞(BMSCs)等细胞而获得相对单一的骨髓单个核细胞(BMNCs),流式细胞分析表明培养的BMNCs细胞表达CD34、CD44、CD45以及CD90等表面标志,但是几乎不表达CD144和KDR;在未经诱导的情况下,培养的BMNCs也可能自发分化为脂肪细胞;培养BMNCs具有极强的脂肪细胞分化能力,成脂肪细胞诱导后在第3、5、7天,BMNCs成脂率分别为(22.4±3.8)%、(55.6±11.4)%以及(82.4±17.7)%,显著高于诱导培养第1天((1.3±1.1)%,P<0.01). 结论:骨髓单个核细胞体外培养后可以诱导分化为脂肪细胞.
骨髓单个核细胞 体外培养 脂肪细胞 定向分化
周芳 王金祥 李自安 刘菊芬 白盈盈 杨建勇 朱光旭 潘兴华
650032昆明,成都军区昆明总医院细胞生物治疗中心,干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合实验室,云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室;650032昆明,昆明医科大学成都军区昆明总医院临床学院 650032昆明,成都军区昆明总医院细胞生物治疗中心,干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合实验室,云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室
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银川
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424-430
2016-06-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)