采用温度控制的重组大肠杆菌高效生产α-酮基丁酸
α-酮基丁酸被广泛应用于医药和食品添加行业.由于化学法和酶法存在诸多不足,利用发酵法生产α-酮基丁酸及其下游相关产品受到越来越多的关注.本研究以L-苏氨酸高产菌E.coli THRD为出发菌株,首先构建了α-酮基丁酸基因工程菌THRDΔrhtA△ilvIH/pWSK29-ilvA,其摇瓶发酵产量可以达到16.25g/L.但同时发现目的产物α-酮基丁酸的积累会严重抑制宿主菌生长,干扰大肠杆菌的正常代谢.为了进一步提高产量及避免化学诱导剂的使用,利用温度诱导型启动子控制苏氨酸脱水酶表达,通过变温控制进行α-酮基丁酸发酵.前期培养温度为35℃,以保证细胞正常生长,然后升高温度至40℃诱导苏氨酸脱水酶表达.最优条件下,发酵28h,α-酮基丁酸产量达40.82g/L,单位产酸速率1.46g/L/h,糖酸转化率18.75％,具备了工业化生产潜力.
α-酮基丁酸 发酵工艺 重组大肠杆菌 温度控制
齐俊生 谢希贤
代谢控制发酵技术国家地方联合工程实验室,天津300457 天津市氨基酸高效绿色制造工程实验室,天津300457
国内会议
山东潍坊
中文
96-102
2016-05-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）