基于湿法超微提取技术的”膜-凝胶耦合”纯化地龙纤溶活性蛋白的研究--动物类中药提取分离关键技术研究(Ⅰ)

摘要：

地龙湿法超微粉碎提取液通过MWCO50kDa PES膜后,基本可以去除大相对分子质量蛋白(＞50kDa);通过MWCO6kDa PES膜后,可基本去除多肽、核酸等小分子物质.经膜分离纯化的蛋白,通过Sephadex G-75色谱分离后,最终获得三组高纯度蛋白,其中LK1具有纤溶蛋白活性.LK1经过胰蛋白酶酶解后,通过质谱分析,将其肽质量指纹图谱(PMF)与数据库(NCBI)中理论的肽质量指纹加以比较,推测其同源蛋白为:gi|157103994;来是黑斑蚊的占替诺烟酸盐磷酸核糖基转移酶.本研究与目前国内外蛋白纯化方法相比,蛋白纯化步骤得到较大的简化,纯化效率得到很大的提高.说明膜与凝胶耦合纯化蛋白具有独特优势.膜与凝胶耦合的工艺技术有望推广至其他动物类天然产物提取液中蛋白的纯化.

关键词： 动物类中药 有效成分 湿法超微提取 膜分离 凝胶分离

作者: 杨丰云 郭立玮 唐志书 朱华旭 李博 潘永兰 孙静 姚薇薇 张启春 潘林梅

作者单位: 南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心,南京210023;南京中医药大学江苏省植物药深加工工程研究中心,南京210023;福建医科大学,福州350001 南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心,南京210023;南京中医药大学江苏省植物药深加工工程研究中心,南京210023 陕西中医药大学陕西省中药资源产业化过程协同创新中心,咸阳211808 南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心,南京210023;南京中医药大学江苏省植物药深加工工程研究中心,南京210023;南京中医药大学第一临床医学院,南京210023

会议类型: 国内会议

会议名称: 2016年中国-欧盟医药生物膜科学与技术研讨会

会议地点: 山东威海

会议语种:中文

页码: 201-211

在线出版日期: 2016-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）