HO-1调控Nrf2-ARE信号通路对脑出血后神经保护作用的实验研究
目的:脑出血后继发的脑组织损伤是影响预后、转归的关键因素,而炎性因子及自由基的瀑布式产生对脑出血后继发性脑损伤起决定性作用.研究发现血红素加氧酶-1(HO-1)广泛在中枢神经细胞(神经元及胶质细胞)中表达,是Nrf2-ARE信号通路下游一重要抗氧化及解毒蛋白,对脑出血后继发性脑损伤具有抗炎性反应、减轻氧化应激损伤、抑制细胞凋亡等神经保护作用.本研究运用HO-1的选择性抑制剂锌原卟啉-9(ZPP-Ⅸ)抑制HO-1表达,观察用药后Nrf2-ARE通路上下游蛋白Nrf2、NF-KB等表达的变化并结合神经功能评分的差异来探讨HO-1对脑出血灶周神经保护作用的机制,为脑出血的治疗提供新的实验理论依据. 方法:采用SD雄性大鼠基底节自体股动脉血注射法建立脑出血模型，分四组:正常组、ICH组、ZPP-IX+ICH组、DMSO+ICH组。通过免疫荧光、Western blot,RT-PCR观察术后各组不同时间点血肿周围binding-Nrf2 (Nrf2-Keapl)、Nrf2,HO-1,NF-K Bp65,TNF-a蛋白及相应mRNA表达变化并结合神经功能评分，对所得数据进行统计学分析(单因素方差分析，t检验)。 结果:ICH组较正常对照组Nrf2, HO-1, NF-K B, TNF-a的表达在术后6h即开始升高，48-72h达峰，至第7天表达量仍高于正常组，而binding-Nrf2的表达在脑出血后12h开始减少，48h减少最明显。ZPP-IX组与ICH组比较，神经功能障碍加重，出血灶周binding-Nrf2, NF-K Bp65, TNF-a表达增加，Nrf2, HO-1表达减少，差异在48-72h最明显，且差异持续到第7天。DMSO组较ICH组神经功能评分及各蛋白表达无明显差异。 结论:(1)HO-1在脑出血后早期表现出神经保护作用;(2)脑出血后6h开始Nrf2-ARE信号通路激活，表现为Nrf2及下游HO-1的表达增多，而这一变化与ICH后脑水肿的高峰时间一致，推测Nrf2-ARE信号通路通过对抗脑水肿而对出血灶周继发性脑损伤具有神经保护作用，且很可能是通过HO-1这一关键蛋白;(3)HO-1可抑制脑出血后的炎性反应，表现为促进上游蛋白Nrf2的解离及入核，即激活Nrf2并抑制NF-K Bp65及下游炎性因子的表达。
脑出血 神经保护 血红素加氧酶-1 核转录相关因子-2 抗炎作用
吴丹 陈志颖 周君 殷小平
南昌大学第二附属医院神经内科
国内会议
南昌
中文
67-68
2015-05-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）