温阳散寒除湿法对类风湿关节炎Th17/Treg细胞平衡调控作用及机制的研究
目的:研究温阳散寒除湿法(蠲痹颗粒)调控致病性Th17细胞/免疫抑制功能Treg之间平衡而介导治疗类风湿关节炎的作用机理,阐明扶阳学派及吴生元教授应用扶阳理论治疗类风湿关节炎临床优效的科学基础. 方法:构建牛Ⅱ型胶原诱导的DBA/1小鼠关节炎(collagen induced arthritis,CIA)模型,按临床评分平均分为CIA模型组,蠲痹颗粒醇提物组,关节炎临床评分法观察CIA小鼠关节炎发病严重程度;石蜡切片H&E染色分别测定CIA小鼠足爪关节和关节炎病理损伤程度;流式细胞术检测胞内Th17、Treg细胞表达水平;荧光定量PCR法检测Th17细胞相关基因的表达.构建体外T细胞抗原受体(TCR)诱导T细胞体外活化模型,酶联免疫吸附法检测(ELISA)检测Th1、Th17、IL-10及IL-6细胞因子产生水平;Western blot检测TCR信号诱导的纯化T细胞MAPK信号通路(ERK、P38)磷酸化水平. 结果:蠲痹颗粒能显著降低CIA小鼠胶原关节炎的临床评分,明显改善CIA小鼠局部关节炎的症状(P＜0.05),减轻炎症细胞浸润,抑制CIA模型小鼠脾淋巴细胞胞内IL-17细胞因子和Th17细胞相关基因的表达,上调免疫抑制功能Treg的比例,从而维持Treg/Th17正常平衡.蠲痹颗粒醇提物体外给药显著抑制ConA和Anti-CD3诱导的T细胞增殖活性,显著降低Th1细胞因子(IFN-γ)(P＜0.01)、Th17细胞因子(IL-17A)(P＜0.05)和促炎因子IL-6产生水平(P＜0.05),上调IL-10的表达水平(P＜0.05),抑制MAPK通路ERK磷酸化水平. 结论:温阳散寒除湿法可能通过调控Th17细胞/Treg平衡和MAPK信号通路而介导治疗RA的作用,这一作用机制可能为温阳散寒除湿法治疗RA(寒湿痹阻)理论的现代生物学特征,该研究为扶阳学派及吴生元教授应用扶阳理论治疗RA临床提供科学基础,丰富和发展中医治疗痹证理论的科学内涵。
类风湿关节炎 蠲痹颗粒 温阳散寒除湿法 实验药理 Th17细胞 调节性T细胞
万春平 彭江云 李兆福 李小丝 郑喜 祁燕 吴晶金
云南中医学院第一附属医院中心实验室,云南昆明650021 云南中医学院第一附属医院风湿科,云南昆明650021
国内会议
昆明
中文
28-35
2016-12-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）