基于LC/MS的新技术体系及其在中药体内外药效物质分析中的应用
中药药效物质研究是中药现代化的基础,本文利用LC/MS 技术针对该研究各个环节的技术难点,建立新的解决方案,并构建在线提取—检测分析—活性筛选为一体的研究平台.首先,针对传统提取技术耗时耗力等缺点,发明了快速、微量的加压微提取设备,并应用于红花化学成分分析和质量控制研究.在化学成分分析方面，首先以三七总皂苷(PNS)为例为中药有效组分中低含量的物质检测分析建立新的解决方案。该方案利用人参皂苷在负离子模式下形成的加和甲酸离子构建pMRM 策略检测PNS 中皂苷类成分。利用同位素信息判断准分子离子峰，结合质谱裂解规律从PNS 中共鉴定109 个微量皂苷。同时，利用IT-TOF-MS 的优先离子扫描策略证实了该方法可以准确、高效地分析中药提取物中的微量成分。而针对更为复杂的中药复方，本文建立了基于植物来源和结构分类的分析策略，利用LC/IT-TOF-MS 和LC/Q-Trap-MS 技术全面阐释中药复方的化学组成。以感冒灵为例进行研究，首先利用LC/IT-TOF-MS 的中性丢失(NL)辅助全扫描技术得到化学图谱，并利用NL 和诊断离子(DFI)过滤技术快速地提取感冒灵中植物相关化学成分；之后将其母离子和主要碎片离子构成离子对，通过在线质谱参数优化策略得到最佳碰撞电压值后，在LC/Q-Trap-MS 仪器上建立sMRM 的扫描方法，得到感冒灵以及四味单味中药的sMRM 图谱。利用软件自动地将未知化合物归属到其来源植物，由此简化结构鉴定过程；同时，结合文献归纳总结感冒灵中已分离得到化合物的质谱信息，建立基于DFI 和质量亏损的结构分类技术，利用高分辨质谱信息将未知化合物归类到已知的结构类别（如皂苷、黄酮、苯丙素等）中，进而通过质谱裂解碎片信息解析其结构。利用该策略，共在感冒灵中解析了261 个植物相关成分，包括7 个主要结构类别。同时，将此方法与网络药理学技术结合，建立了多成分多靶点筛选模型，快速地筛选加味五子衍宗丸潜在的抗炎药效物质。在此基础上，建立了基于DFI 的策略快速地从内源性物质中提取药源性物质并鉴定，明确了保元汤体内药效物质，并结合网络药理学初步阐明了其作用机制。结果证实，上述基于LC/MS 的新技术平台能够高效、全面地阐明中药体内外潜在的药效物质。
中药药效物质 化学分析 色谱法 质谱法
陈金凤 宋月林 逯颖媛 王金龙 郭晓宇 赵明波 屠鹏飞 姜勇
北京大学医学部,中医药现代研究中心
国内会议
北京
中文
1-3,1-33,1
2016-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）