头穴透刺对MCAO/R大鼠缺血脑组织TLR4、MyD88蛋白表达的影响
目的：脑缺血再灌注损伤(CIRI)是一个较为复杂的病理生理过程,至今尚未完全明确.而近来研究表明,炎症反应是CIRI发生的重要病理机制之一.其中作为炎症反应操盘手的TLR4/MyD88/NF-κB细胞信号传导通路上所有关键信号分子均可直接或间接影响机体炎症的发生、发展.本文通过观察头穴透刺对脑缺血再灌注模型大鼠神经功能缺损、脑梗死体积、皮层神经元损伤及缺血侧脑组织中TLR4、MyD88蛋白表达的影响,探讨头穴透刺对脑缺血再灌注模型大鼠的脑保护作用及可能的作用机制. 方法：99只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和针刺组.每组根据再灌注时间分为IR1d(n=13)、IR3d(n=10)、IR7d(n=10)三亚组.采用改良的Zea Longa线栓法,制备右侧大脑中动脉缺血2h再灌注(MCAO/R)大鼠模型;假手术组不中断大脑中动脉血流.针刺组大鼠在右侧头部百会至曲鬓穴线进行透刺治疗.各组大鼠相应时间点进行Belayev的12分评分法的神经功能评分测定;TTC染色检测再灌注1d大鼠脑梗死体积;HE染色观察皮层神经元损伤及炎性细胞浸润情况;免疫组化、Western blot技术检测各组大鼠缺血侧脑组织TLR4、MyD88蛋白表达水平. 结果：1.针刺组大鼠在再灌注3d、7d,神经功能缺损程度较模型组明显减轻(P＜0.05).2.在再灌注1d,针刺组大鼠相对脑梗死体积较模型组明显减少,有统计学差异(P＜0.05).3.再灌注各个时间点,针刺组大鼠缺血侧皮层神经元损伤程度及炎性细胞浸润情况均较模型组明显减轻.4.针刺组大鼠缺血侧脑组织中TLR4阳性细胞数和相对蛋白含量在再灌注各个时间点均较同期模型组明显降低(P＜0.05),而MyD88阳性细胞数和相对蛋白含量在再灌注3d、7d,较同期模型组明显降低(P＜0.05). 结论：头穴透刺治疗可显著改善MCAO/R大鼠神经功能缺损,减少脑梗死体积,减轻皮层神经元损伤、炎性细胞浸润,具有脑保护作用;其作用机制可能与头穴透刺可抑制缺血侧脑组织中TLR4、MyD88蛋白表达,从而阻断TLR4/MyD88/NF-κB细胞信号通路转导,继而拮抗该通路触发的炎症级联反应有关.
脑缺血再灌注损伤 头穴透刺 髓样分化因子88 Toll样受体4
吴明娟 孙晓伟 孙忠人 陈英华 金弘 刘婷婷 刘韬 张宏伟
黑龙江省中医药科学院,黑龙江哈尔滨 150036 黑龙江中医药大学附属第一医院,黑龙江哈尔滨 150040 黑龙江中医药大学,黑龙江哈尔滨 150040
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2017-12-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）