N-乙酰半胱氨酸对染尘肺泡巨噬细胞自噬的影响
目的:探讨抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)对染尘大鼠肺泡巨噬细胞NR8383的自噬活动的影响. 方法:常规培养NR8383细胞,染尘3、6、12、20、24h,分别收集细胞上清液,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-βⅠ(TGF-βⅠ)表达水平,确定细胞染尘模型时间;给予NAC干预20h后,采用蛋白免疫印迹法和细胞免疫荧光法检测自噬水平. 结果:体外巨噬细胞染尘模型最佳时间为20h;NAC+矽尘组NR8383细胞TNF-α表达”(116.82±8.98)pg/mL”低于矽尘组”(1823.58±764.85)pg/mL”(P<0.05);NAC+矽尘组NR8383细胞TGF-βⅠ表达”(8.27±3.62)pg/mL”与矽尘组”(14.28±5.71)pg/mL”比较差异无统计学意义(P>0.05);NAC+矽尘组与矽尘组NR8383细胞LC3蛋白表达分别为”(3.52±0.57)、(3.84±0.53)pg/mL”高于对照组”(2.24±0.56)pg/mL”;免疫荧光结果显示,矽尘组NR8383细胞在20h荧光信号强于对照组;NAC+矽尘组NR8383细胞荧光强度与矽尘组无明显差异. 结论:矽尘刺激使NR8383细胞自噬表达增强;NAC可降低细胞上清液中TNF-α分泌水平,NAC可能参与染尘肺泡巨噬细胞的炎症反应过程.
矽肺 N-乙酰半胱氨酸 染尘肺泡 巨噬细胞 细胞自噬
王晓艳 宋瑞瑞 张晓雪 沈福海 蒋守芳 佟俊旺 李清钊 金玉兰
华北理工大学公共卫生学院,河北 唐山 063000
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2016-08-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)