禽致病性大肠杆菌Tshs单克隆抗体的制备及夹心间接ELISA方法的建立
以O78禽致病性大肠杆菌(APEC)菌株培养上清浓缩获得的温度敏感血凝素分泌型蛋白(Tshs)为抗原,免疫BALB/c小鼠,制备抗APEC-Tshs单克隆抗体(McAb).以抗APEC-Tshs McAb包被酶标板,初步建立了检测APEC-Tshs抗体的夹心间接酶联免疫吸附试验(Si-ELISA)方法.结果表明抗APEC-Tshs McAb抗体亚型为IgG1型,滴度可达1∶105.夹心间接ELISA包被稀释度为1∶3×104,抗原最适反应浓度和鸡血清最适稀释度分别为0.722μg/孔和1∶200,鸡血清最适孵育时间为30min,HRP-羊抗鸡IgY最适孵育浓度为1∶104,孵育时间30min;最适封闭液为0.5％BSA,封闭时间1h,酶作用底物最适反应温度为37℃避光反应10min.
禽致病性大肠杆菌 温度敏感性血凝素 分泌型蛋白 单克隆抗体 酶联免疫吸附法
刘传青 马兴树 王振华 石虎 王晓波 杨广平
河北工程大学农学院分子生物学实验室,河北邯郸 056021 河北科星药业有限公司河欣科技中心生物工程实验室,石家庄 050200
国内会议
第五届(2016)中国白羽肉鸡产业发展大会暨第四届全球肉鸡产业研讨会
沈阳
中文
225-229
2016-05-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）