毛细管固定化酶微反应器用以α-葡萄糖苷酶的酶促反应动力学和抑制反应动力学研究
固定化酶是指将游离酶与某些不溶于反应体系的固体材料相结合,限制其在特定的区域内进行酶促反应,并使酶能够回收及重复使用的技术.毛细管酶微反应器(capillary immobilized enzymemicroreactor,CIMER)是固定化酶的一种形式,以毛细管为载体,将酶固定于毛细管内壁进行酶促反应、抑制反应、酶抑制剂筛选等的研究.CIMER具有样品用量少、成本低、稳定性高、可连续使用、易于实现酶分析的自动化和微型化等优势.本实验应用戊二醛交联法将α-葡萄糖苷酶固定于毛细管内壁，通过压力将底物压入毛细管内推送至检测窗口，利用在405nm下只有产物有吸收来检测产物，从而进行酶促反应和抑制反应动力学的研究。该方法具有良好的日内重现性（峰面积0.4％，迁移时间1.0%，n=6），日间重现性（峰面积5.1%，迁移时间3.3%，n=7）和稳定性（连续使用100次，酶活降低6.7%）。实验得酶促反应米氏常数Km为0.56mM，阿卡波糖半数抑制浓度/Cso为99.48μM，与文献报导值相近。实验结果表明，所建立的方法准确可靠，稳定性高，重现性好，可适用于类似酶反应体系的研究。
α-葡萄糖苷酶 毛细管固定化酶微反应器 反应动力学 抑制反应动力学
刘冬梅 陈娟 师彦平
中国科学院兰州化学物理研究所 中科院西北特色植物资源化学重点实验室,兰州,730000,兰州市城关区天水中路18号;中国科学院大学,北京,100049,北京市石景山区玉泉路19号甲 中国科学院兰州化学物理研究所 中科院西北特色植物资源化学重点实验室,兰州,730000,兰州市城关区天水中路18号
国内会议
中国中西部地区第五届色谱学术交流会暨重庆市色谱年会、甘肃省第十四届色谱年会
重庆
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2016-04-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）