利用慢病毒表达载体干扰梅花鹿角柄骨膜细胞P21基因
利用慢病毒干扰系统,对东北梅花鹿角柄骨膜干细胞(PP细胞)P21基因进行干扰.结果表明:1)筛选出的两条针对梅花鹿P21基因的siRNA与载体质粒PLVTHM连接成功,并与pMD2.G、pCMV-dr8.9质粒共转染到293t细胞,获得重组慢病毒;2)通过感染PP细胞并利用流式细胞仪进行分选,获得了纯度90%以上的感染细胞;3)荧光定量RT-PCR检测表明P21基因的mRNA水平大幅度下调,干扰效率达到70%.表明本实验成功干扰了P21基因在PP细胞中的表达,获得了低表达P21的PP细胞系,为以后研究P21基因在鹿茸再生过程中的作用奠定了基础.
鹿茸再生 角柄骨膜干细胞 P21基因 功能鉴定 慢病毒表达载体
郭倩倩 王大涛 褚文辉 鲁晓萍 秦欣 赵海平 李春义
江苏科技大学,镇江 212018;中国农业科学院特产研究所, 吉林省特种经济动物分子生物学国家重点实验室培育基地, 长春 130112 中国农业科学院特产研究所,吉林省特种经济动物分子生物学国家重点实验室培育基地, 长春 130112
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2016-07-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)