PLCE1基因及rs2274223和rs3765524单体型的克隆与表达
目的：克隆人PLCE1基因,构建PLCE1rs2274223和rs3765524GT(PLCE1Minor)和AC(PLCE1Major)单体型真核表达重组载体,研究PLCE1基因多态性及单体型与基因表达的相关性. 方法：利用重叠延伸PCR、In-Fusion技术构建PLCE1真核表达载体;基于同源重组的双点突变技术改造目的基因;利用基因转染实时定量、PCR和蛋白印迹等技术实现PLCE1表达载体在真核细胞中的过表达及表达水平的鉴定. 结果：成功扩增并获得了全长6927bp的人PLCE1cDNA并经过DNA测序证实,与NCBI数据库PLCE1参考序列(NM_016341)比较,发现编码区3554-3572bp处存在18bp连续碱基插入,其余序列基本匹配成功构建了.PLCE1Minor和PLCE1Major两种单体型重组真核表达载体,转染细胞揭示PLCE1Minor型的mRNA转录和蛋白质表达水平均高于Major型. 结论：发现了一种新PLCE1mRNA转录本,成功构建了2种单体型真核表达载体;发现PLCE1rs2274223G-rs3765524T单体型能够促进自身mRNA和蛋白质表达,为进一步揭示PLCE1SNPs与癌症易感性的关系奠定了基础.
癌症易感性 磷脂酶C-ε1基因 单核苷酸多态性 基因克隆 基因表达
李达 代鹏 王伟 张文涛 汪钦 束毅 祝春来 纪奇峰 颜真
第四军医大学药学院药物基因组学教研室 西安 710032
国内会议
哈尔滨
中文
1-17
2016-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）