基于CRISPR/Cas9技术的烟草NtDXR基因敲除及功能分析
为研究烟草5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶(1-Deoxy-D-xylulose-5-phosphate reductoisomerase,DXR)基因的表达模式和功能,旨在明确NtDXR基因在烟草萜类化合物代谢中的作用，为选育烟草优良品种提供理论基础。从普通烟草(Nicotiana tabacum)品种红花大金元中克隆了NtDXR基因,并通过荧光定量PCR技术分析了NtDXR在红花大金元不同发育时期、不同组织中的表达模式.同时利用CRISPR/Cas9技术构建了NtDXR敲除载体,获得了DXR基因突变的植株.结果表明:NtDXR基因在花中的表达量最高,在雌蕊和叶中次之;利用CRISPR/Cas9系统定点敲除NtDXR基因后,检测目的基因靶位点序列发现有碱基的插入、缺失与置换,并且部分T0代转基因阳性植株呈现白化表型,暗示NtDXR基因在烟草叶绿素等色素合成过程中起重要作用,推测NtDXR基因的突变能阻断烟草质体色素的合成.
烟草 品种选育 5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶 基因敲除
聂梦云 高军平 罗培 陈晓乐 易小慧 王根洪 夏庆友
家蚕基因组生物学国家重点实验室 西南大学,重庆市北碚区天生路2号400715
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2016-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）