稳定同位素马来酸酐标记结合液相色谱-质谱技术在定量蛋白质组学中的应用研究
以合成的多肽为模型，研究了马来酸酐对赖氨酸侧链氨基和多肽N端氨基的衍生化反应。借助于MALDI-TOF质谱的表征和评价，优化了反应溶液、反应时间、反应物比例等实验条件。进而，将该方法应用于蛋白溶菌酶及Hela全细胞裂解液蛋白质组的定量分析，结果表明这一标记方法具有标记效率高、定量准确的特点。另外，在一次标记的基础上，探究了二次标记的可能性。分别采用了半胱氨酸、巯基乙醇、丙硫醇等巯基试剂和马来酸酐衍生产物上的不饱和双键进行“点击反应”，实现了蛋白质和多肽的二次标记，并最终应用于Hela全细胞裂解液蛋白质组的定量分析。通过对标记前后多肽在液相的保留时间进行比较，发现马来酸酐标记后增加了多肽的疏水性，有利于较短多肽的分析与鉴定，从而提高了蛋白质鉴定的序列覆盖率和准确性。
蛋白质组学 马来酸酐标记 液相色谱 质谱分析
田姗姗 郑淑珍 何锡文 张锴 张玉奎
天津医学表观遗传学协同创新中心,天津医科大学基础医学院,生物化学与分子生物学系,天津 300070 南开大学化学学院,天津300071 中国科学院大连化学物理研究所,国家色谱研究分析中心,辽宁116023
国内会议
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327-327
2017-05-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）