鸭呼肠孤病毒感染性克隆的构建及拯救病毒的体外生物学特性分析
新型鸭呼肠孤病毒是一种引起鸭传染病的重要致病因子,为10节段的现链RNA病毒,目前缺乏反向遗传操作平台以研究其发病机理、宿主谱改变等.本文建立10质粒全长系统,其中引入M2节段1189-1194位引入酶切位点HindⅢ(AAGCTG→AAGCTT),在脂质体介导下,与能表达T7RNA聚合酶的痘病毒共转染细胞,收集转染细胞液,在鸡胚上连续传代,获得拯救病毒.结果显示:拯救病毒经测序及分子标记验证,表明获得稳定的拯救病毒;通过细胞病变观察及蚀斑实验证实,拯救病毒能引起与亲本病毒一致的细胞病变和蚀斑形态;Western Blotting和间接免疫荧光实验表明,拯救病毒成功.体外实验研究证实成功构建并获得NDRV的感染性克隆,为从基因水平深入研究该病毒的致病机制及疫苗开发等提供了反向遗传操作平台.
鸭呼肠孤病毒 感染性克隆 拯救病毒 体外生物学
吴巧梅 丁明洋 李传峰 刘光清 陈宗艳
中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241
国内会议
中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会
昆明
中文
40-43
2016-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）