猪流行性腹泻强弱毒株双重Taqman-MGB荧光定量PCR检测方法的建立

摘要：

目的：为了建立一种鉴别猪猪流行性腹泻强毒和疫苗毒的TaqMan-MGB荧光定量PCR方法. 方法：根据猪流行性腹泻病毒基因组基因设计一对通用引物和2条特异性MGB探针,通过反应体系和反应条件的优化,进行特异性、灵敏度和重复性检验. 结果：该方法在通过StepOnePlus分析软件可得出该病毒强弱毒的标准曲线的相关单数(R2)均为:0.993,斜率为:-3.122,扩增效率为109.102％.扩增曲线圆滑平整且在一定范围(108拷贝/μL-102拷贝/μL)内都具有良好的线性关系.说明该标准曲线的各个点有明显的线相关性,梯度稀释很好.与猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)均无交叉反应,具有高特异性. 结论：成功建立了一种能快速、敏感、特异地鉴别猪流行性腹泻炎强毒和疫苗毒的TaqMan-MGB荧光定量PCR方法.

关键词： 猪流行性腹泻病毒 强毒株 弱毒株 聚合酶链式反应 荧光鉴别

作者: 石坤 魏建超 刘希茜 吴亚玲 李伦峰 邵东华 邱亚峰 马志永

作者单位: 中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会

会议地点: 昆明

会议语种:中文

页码: 66-68

在线出版日期: 2016-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）