0型FMDV衣壳抗原的耐酸改造及其在昆虫细胞中的表达

摘要：

为筛选与0型FMDV衣壳政酸感性相关的位点,通过突变相关酸敏感性位点以提高衣壳蛋白在Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中的表达量.本研究以牛源0型FMDV ON株为研究对象开展耐酸性毒株的筛选工作,筛选得到存在于P1上的5个错义突变位点.然后经过耐酸改造,利用杆状病毒表达系统获得表达0型FMDV衣壳蛋白的重组杆状病毒rBac-P12A3C.外源蛋白的表达检测结果表明,表达产物能够被0型FMDV多克隆抗体识别.兔疫电镜观察到了直径约27nm的正六边形颗拉.用蛋白样品rBac-P12A3C对BALB/c小鼠肌肉注射兔疫,通过液相阻断ELISA的方法检测0型口蹄疫病毒的抗体效价,最后取小鼠脾脏利用ELISPOT的方法检测细胞因子IL-4和IFN-γ的水平.结果表明蛋白样品rBac-P12A3C可以激发小鼠的体液兔疫反应,同时还可以很好的激发小鼠的细胞兔疫反应.本研究为后期研制出FMD的基因工程亚单位疫苗奠定了基础.

关键词： 口蹄疫病毒 衣壳抗原 耐酸改造 昆虫细胞 蛋白表达

作者: 解银丽 李志勇 张志东 赵付荣 常惠芸 张永光

作者单位: 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室,甘肃兰州730046

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会

会议地点: 昆明

会议语种:中文

页码: 93-97

在线出版日期: 2016-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）