牛病毒性腹泻病毒RPA-LFD快速检测方法的建立

摘要：

本研究基于BVDV5”UTR基因保守序列，设计并合成引物和探针，优化各种反应条件及反应体系，建立了一种BVDV重组酶聚合酶扩增(RPA)等温检测方法，检测结果在抗FAM金标结合和抗生物素捕获抗体的侧流层析试纸条上显示。结果表明，所建立的RPA方法在38℃水浴锅中恒温反应20min，即可实现对目的片段的有效扩增;以已知病毒滴度的cDNA为模板，RPA的检测限达到2TCID50的靶标分子，同世界动物卫生组织(OIE)推荐的实时荧光PCR方法检测限一致;与感染牛其他病毒的基因组cDNA DNA没有交叉反应，特异性强。所建立的牛病毒性腹泻病毒RPA-LFD检测方法，可应用于血液、鼻拭子、精液、粪便、乳汁、气溶胶样本、组织器官等样本的检测，能特异、灵敏地筛查阳性持续感染牛，为及时淘汰牛群内的隐患提供技术支持。

关键词： 牛病毒性腹泻病毒 重组酶聚合酶扩增 等温侧流层析 分子检测

作者: 侯佩莉 王洪梅 何成强 何洪彬

作者单位: 山东师范大学 生命科学学院;山东省农业科学院 奶牛研究中心 山东师范大学 生命科学学院

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会

会议地点: 昆明

会议语种:中文

页码: 317-317

在线出版日期: 2016-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）