应用CRISPR/Cas9技术建立TLR3基因敲除小鼠模型
TLR3是识别病毒双链RNA的一种模式识别受体,在介导天然兔疫反应中发挥重要作用.为研究TLR3在病毒感染中的作用机制,构建TLR3基因敲除小鼠模型.根据小鼠TLR3基因组序列,设计、构建了转录载体,将体外转录的sgRNA与Cas9mRNA显微注射到ICR小鼠受精卵;而代鼠尾基国组PCR、测序证明敲除了13bp,表型为杂合子(TLR3+/-)。与WT雄鼠经过两个世代的遗传繁育，在巴代杂合子全同胞合笼，PCR,T7E1酶切、测序证明m代中存在纯合子。聚肌胞苷酸处理24h后，TLR3-/-小鼠较WT小鼠外周血中淋巴细胞百分比显著降低，单核细胞中性粒细胞显著升高，脾脏中TRIF、Mx、IL-6和TNF-α表达量显著降低，外周血中CDS6＞细胞比例显著降低，CD49＞细胞未见显著差异，细胞毒性T淋巴细胞显著降低。
兽医学 Toll样受体3 基因敲除 病毒感染 免疫机制
王伟 姜雪婷 李永青 庞忠兵 孙海阳 陈洪岩 孟庆文
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/实验动物与比较医学团队,黑龙江哈尔滨150069
国内会议
中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会
昆明
中文
353-353
2016-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）