嗜热真菌Beta-1,3-葡聚糖酶结晶、晶体结构解析与催化残基鉴定
真菌Beta-1,3-葡聚糖酶(分为内切酶和外切酶)具有重要的生物学功能,涉及真菌的众多生长发育过程.尽管目前仅有真菌的一个内切Beta-1,3-葡聚糖酶晶体结构被解析,但它的催化残基是推测性的,没有实验证明;另一方面,真菌外切Beta-1,3-葡聚糖酶的晶体结构是不清楚的.本研究以嗜热毛壳菌(Chaetomium thermophilum)的Beta-1,3-葡聚糖酶(CtGluN)为研究对象,将它的基因在毕赤酵母中获得高效表达,层析纯化蛋白并进行结晶,得到了它的晶体.X-衍射显示:酶蛋白以单分子不对称形式存在.定点突变实验表明:保守的Q167、Q218、E608、E631涉及酶的催化活性.产物鉴定显示:它是一种外切Beta-1,3-葡聚糖酶.目前酶的晶体结构正在解析中.酶晶体结构解析和定点突变为理解真菌Beta-1,3-葡聚糖酶的催化机制和热稳定性提供证据.
嗜热毛壳菌 Chaetomium thermophilum Beta-1,3-葡聚糖酶 结晶 晶体结构
Anastassios C.Papageorgiou 陈进银 李多川
芬兰图尔库大学,芬兰图尔库20521 山东农业大学,泰安271018
国内会议
泰安
中文
99-99
2015-10-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)