芜菁花叶病毒P3蛋白与拟南芥AtSWEET1蛋白的互作研究
芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)是马铃薯Y病毒科(Potyviri-dae)马铃薯Y病毒属(Potyvirus)的重要成员.该病毒具有广泛的寄主范围,可侵染至少156属的300多种植物,尤其对十字花科蔬菜造成严重威胁,同时也是传播最广、破坏性最强的侵染芸薹属植物的病毒,给农业生产带来巨大损失.TuMV基因组是正义单链RNA,包含一个大的开放阅读框(ORF),P3蛋白是该病毒编码的一个重要蛋白,相比其他蛋白,P3蛋白高度变异,对其结构和功能了解较少.目前已知,P3是一个膜蛋白,在TuMV侵染寄主的过程中发挥着一定的作用,可能涉及决定致病性、病毒移动、病毒复制、症状形成和寄主抗性等方面.为了解TuMV P3蛋白与寄主植物之间的互作关系,利用TuMV JCR06分离物p3基因(GenBank登录号：KP165425)构建诱饵载体,通过酵母双杂交融合的方法,从拟南芥酵母双杂交cDNA文库中筛选到一个与P3蛋白互作的糖转运蛋白(AtSWEET1),并用共转化的方法进行了验证两者之间的互作.对p3基因C端进行缺失,利用p3基因N端663 bp构建诱饵载体,并与At-SWEET1基因猎物载体共转化酵母,进一步验证AtSWEET1和p3基因N端663 bp同样存在互作.将p3基因和AtSWEET1基因分别连接到植物表达载体pCG-1301上,转化农杆菌EHA105,侵染本生烟进行亚细胞定位分析,结果显示二者均存在于本生烟表皮细胞的细胞膜上.在此基础上,利用双分子荧光互补技术(BiFC)验证P3蛋白与AtSWEET1蛋白之间的相互作用,结果表明二者在洋葱内表皮细胞内互作,且作用部位位于细胞膜,推测两个蛋白均为膜蛋白,这为研究TuMV P3蛋白与AtSWEET1蛋白的互作机制及其在TuMV致病过程中的功能奠定了理论基础.
芜菁花叶病毒 P3 糖转运蛋白AtSWEET1 蛋白互作
张雅琦 祝富祥 王艳 李向东 潘洪玉 刘金亮
吉林大学植物科学学院,长春130062 山东农业大学植物保护学院,泰安271018
国内会议
泰安
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120-120
2015-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）