双链RNA技术在植物病毒病监测中的应用
正常的植物体内很难检测到双链RNA (double-stranded RNA,dsRNA)的存在,但是植物遭受病原生物入侵后,往往产生大量的dsRNA,有些是植物应对病原物入侵而产生的小分子dsRNA,有些是RNA病毒入侵寄主而产生的复制中间体(replicative intermediate,RI)或病毒本身的基因组核酸就是dsRNA.鉴于90％的植物病毒病是RNA病毒引起的情况,探讨了dsRNA技术(dsRNA提取和克隆技术)在植物病毒病监测中的应用.具体应用如下：①dsRNA病毒病的监测,可选择双链RNA快速小量提取法,它能够从0.5～0.8 g的植物组织中快速提取dsRNA,借助dsRNA病毒特异的基因组图谱完成对样品的鉴定,在水稻病毒病的监测中得到了应用；②单链RNA病毒病的监测,可选择双链RNA快速大量提取法,即富集复制中间体的方法,从5～10 g植物组织中富集病毒的dsRNA,然后通过克隆和序列分析完成鉴定,该方法在蔬菜和花卉病毒病中得到了应用；③新病毒的挖掘,借助dsRNA技术,发现了6种新的病毒,其中3种病毒的基因组已登录Genbank,即Brassica compestris chrysovirus 1 (KP782029、KP78203、KP782031)、Panax notoginseng virus A(KT388111)、Erysiphe cichoracearum endornavirus (KT388110).因此,双链RNA技术可以作为植物病毒病监测的一种重要手段.
双链RNA技术 dsRNA病毒 复制中间体
张俊 胡荣 李政 方守国 郭灵芳 李凡 章松柏
主要粮食作物产业化湖北省协同创新中心,荆州434025 长江大学工程技术学院,荆州434020 云南农业大学植物保护学院,昆明650201
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2015-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）