补肾法疏肝法对体外培养小鼠卵泡发育过程中卵母细胞GDF-9影响研究
目的：观察补肾法、疏肝法对于体外培养小鼠卵泡发育过程中窦前卵泡形态及对卵母细胞GDF-9的影响. 方法：选用出生D12昆明乳鼠,随机分为3组：补肾组、疏肝组、正常组,采用机械法分离窦前卵泡,37℃、5％CO2(V/V)、100％湿度培养,24h后卵泡贴壁.分别加入补肾调经方和逍遥丸大鼠含药血清,正常大鼠血清为正常组.培养6d,隔天换液1/2,分别于D2、4、6收集后胶原酶消化窦前卵泡,分离得卵母细胞.倒置显微镜观察卵泡形态及成活数;采用实时荧光定量PCR检测GDF-9mRNA的表达;采用免疫组化法检测卵母细胞中GDF-9蛋白的表达. 结果：体外培养过程中可见窦前卵泡贴壁、颗粒细胞增殖及卵泡直径增加;疏肝组、补肾组卵泡成活数较正常组均增多(P＜0.05);体外培养过程中补肾组、疏肝组、正常组GDF-9mRNA表达均逐渐降低(P＜0.05),补肾组、疏肝组较正常组卵母细胞GDF-9mRNA含量增加,其中补肾组优于疏肝组(均P＜0.05).补1肾组、疏肝组、正常组GDF-9蛋白表达均逐渐降低(P＜0.05),而补肾组、疏肝组较正常组卵母细胞GDF-9蛋白含量增加,其中补肾组优于疏肝组(均P＜0.05). 结论：逍遥丸和补肾调经方含药血清可提高体外培养小鼠窦前卵泡的存活数,卵母细胞分泌因子GDF-9卵泡发育初期促进卵母细胞发育的作用更加明显,补肾调经方在窦前卵泡体外发育过程中对GDF-9的影响较逍遥丸显著.
补肾调经方 逍遥丸 卵母细胞 GDF-9蛋白
范丽洁 杜惠兰
河北中医学院,河北石家庄 050000
国内会议
长沙
中文
173-176
2015-09-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）