体外温热刺激对脐静脉血管内皮细胞HSP70、HSP90的mRNA和蛋白质的表达量的影响
目的：根据脐静脉内皮细胞在接受热刺激以后,细胞内保护性蛋白HSP70和HSP90表达发生的变化,探讨灸络治疗可以在细胞层面自发形成保护和调节的作用. 方法：利用人脐静脉内皮细胞的体外培养搭建脉络系统的研究平台,将脐静脉血管内皮细胞分为37℃组对照组、40℃温度刺激组、43℃温度刺激组,温度刺激30min,每日2次,共3日.倒置显微镜下观察细胞形态的动态变化.应用QPCR和western-bolt技术,检测热刺激后细胞中HSP70和HSP90的mRNA和蛋白质表达情况. 结果：①用倒置显微镜观察：细胞经热刺激都会立刻出现浊肿现象,43℃细胞的浊肿程度较40℃细胞更为明显.浊肿约在刺激结束后6-8小时逐渐减弱.总刺激结束24小时后,40℃组的肿浊程度较前减轻,同37℃组相比细胞形态差异不大,且细胞膜边缘的颗粒状物质减少.而43℃组细胞胞浆内颜色较37℃组明显加深,细胞体积明显减小,细胞间隙明显增大.②HSP70和HSP90的mRNA和蛋白质的表达量情况为：40℃温度刺激组各指标较37℃正常体温对照组显著增强(P＜0.05);43℃组与37℃之间各指标差异不显著(P＞0.05);40℃组同43℃组相比HSP70的mRNA和蛋白质及HSP90的mRNA含量有显著差异(P＜0.05),40℃组同43℃组相比HSP90的蛋白含量无显著差异(P＞0.05). 结论：适宜的温度刺激可以使内皮细胞中负责蛋白质保护和修复的热休克蛋白HSP70和HSP90的表达明显提高.不仅有利于细胞的热耐受,并可进在细胞层面直接调节细胞的生命物质的结构,改善细胞的功能.
灸络治疗 脐静脉内皮细胞 温度刺激 HSP70蛋白 HSP90蛋白 蛋白表达
张宁 杨孝芳
贵阳中医学院 550002 贵阳中医学院针推学院 550002
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196-208
2014-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）