SHANK2对根尖牙乳头干细胞牙向/骨向分化的影响

摘要：

目的：牙源性间充质干细胞是间充质干细胞(MSCs)的成员之一,具有自我更新及多向分化潜能,在牙齿形成和矿化过程中发挥重要作用.有多种基因和信号通路调控其分化,但机制尚不清楚.在对牙周膜干细胞(PDLSC)和脐带干细胞(WJCMSC)的基因芯片对比分析中首次发现SHANK2在前者中有更高表达,SHANK2是SHANK家族成员之一,关于SHANK2的研究目前集中在神经系统领域,在口腔领域还未见报道.牙源性间充质干细胞包括多个成员,其中根尖牙乳头干细胞具有的高增殖潜能,使其在组织再生,尤其是牙根再生中发挥重要作用.本研究揭示了SHANK2对根尖牙乳头干细胞牙向/骨向分化的影响. 材料与方法：体外实验利用real-time RT-PCR检测了SHANK2在各间充质干细胞中的表达.通过shRNA的方法将根尖牙乳头干细胞(SCAPs)中的SHANK2沉默,并用real-time RT-PCR和Western Blot检测了沉默效果.体外对SCAPs进行牙向/骨向分化诱导,进行碱性磷酸酶染色及活性检测,茜素红染色,钙离子浓度测定等,检测了牙本质涎磷蛋白(DSPP),牙本质基质蛋白1(DMP1),及成骨相关转录因子RUNX2,OSX的表达.体内实验将SCAP植入裸鼠皮下,检测了SHANK2沉默对SCAPs体内成牙样/骨样组织的能力的影响. 结果：相较于其他来源的MSCs,SHANK2在牙源性MSCs中显著高表达;SHANK2沉默会抑制SCAPs的成骨分化能力,并抑制DSPP,DMP1,RUNX2和OSX的表达;SHANK2沉默会抑制SCAPs在体内的成牙样/骨样结构的能力. 结论：本研究揭示了SHANK2沉默会抑制SCAPs的牙向/骨向分化能力,发现了SHANK2在口腔领域的新功能,为牙源性间充质干细胞的分子调控机制提供了新的信息,为牙齿再生及组织工程修复提供了新的理论依据.

关键词： 牙齿再生工程 根尖牙乳头干细胞 牙向分化 骨向分化 SHANK2基因

作者: Lijia Guo Luyuan Jin Juan Du Chunmei Zhang Zhipeng Fan Songlin Wang

作者单位: Molecular Laboratory for Gene Therapy and Tooth Regeneration,Beijing Key Laboratory of Tooth Regener Molecular Laboratory for Gene Therapy and Tooth Regeneration,Beijing Key Laboratory of Tooth Regener Laboratory of Molecular Signaling and Stem Cells Therapy,Beijing Key Laboratory of Tooth Regeneratio Molecular Laboratory for Gene Therapy and Tooth Regeneration,Beijing Key Laboratory of Tooth Regener

会议类型: 国内会议

会议名称: 2015北京口腔医学论坛

会议地点: 北京

会议语种:中文

页码: 41-64

在线出版日期: 2015-12-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）