豆粕发酵用高产蛋白酶芽孢杆菌的筛选及鉴定

摘要：

目的：本试验旨在从生境中筛选适用于高肽含量发酵豆粕的高产蛋白酶芽孢杆菌. 方法：初筛:样品于无菌的8.5％生理盐水中均质后80℃水浴10min,10倍梯度稀释至一定倍数,取后三个梯度涂布于ND双层平板(上层为营养琼脂,下层为脱脂牛奶),37℃培养24h,通过革兰氏染色、镜检以及菌落周围水解透明圈的情况对菌株进行筛选;复筛:初筛得到的菌株接种于豆粕发酵培养基,180r/min、37℃培养48h,根据上清液中蛋白酶活性进行复筛;菌种鉴定:运用16S rDNA和GyrA部分序列扩增测序对筛选得到的菌株进行鉴定. 结果：通过初筛,从样品中得到了7株产蛋白酶丰富的G+芽孢杆菌;复筛的条件下T1发酵上清液蛋白酶活性达1547.49U,极显著高于其它6株(P＜0.01);经分子鉴定得T1为解淀粉芽孢杆菌. 结论：由此,从豆豉中筛选得到一株适用于豆粕发酵、产蛋白酶丰富的解淀粉芽孢杆菌T1,它在37℃、180r/min条件下于豆粕发酵培养基中培养42h后上清液蛋白酶活性可达1683.99U.

关键词： 豆粕发酵 芽孢杆菌 菌株筛选 菌种鉴定 蛋白酶活性

作者: 刘旭辉 杨亚晋 蔡军 商婷婷 张日俊

作者单位: 中国农业大学动物科技学院动物营养国家重点实验室,北京100193 西南农林大学生命科学学院,昆明650224

会议类型: 国内会议

会议名称: 2015第二届北京保护健康协会微生态学学术交流会暨微生态产业研讨会(北京)

会议地点: 北京

会议语种:中文

页码: 154-162

在线出版日期: 2015-12-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）