原代脐静脉内皮细胞分离培养及细胞衰老模型构建
探讨人脐静脉内皮细胞的原代培养、鉴定方法,建立血管内皮细胞体外衰老模型,为研究血管内皮细胞衰老提供细胞模型.于华中科技大学同济医学院附属同济医院产科,经患者知情同意,取正常足月产胎儿脐带一根(长约15 cm)冲净淤血,采用0.1％胶原酶Ⅱ消化.收集细胞并用含有内皮生长因子的完全培养基培养细胞.在倒置显微镜下观察细胞的形态学特点,同时用免疫组织化学的方法对所得细胞进行鉴定.利用连续传代方法构建内皮细胞复制性衰老模型.利用血管紧张素Ⅱ(Ana Ⅱ 2.5umol/l)或过氧化氢(H2O250umol/1)构建内皮细胞应激性衰老模型.应用衰老经典指标半乳糖苷酶染色及western blot检测衰老相关蛋白P53、P21的表达量来检测细胞衰老情况.
人脐静脉内皮细胞 原代培养 鉴定方法 细胞衰老模型
严金华 黄毅 黄会晶 丁玲 张乐 张存泰
华中科技大学同济医学院附属同济医院综合科,430030
国内会议
苏州
中文
132-132
2015-09-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）