肥大細胞類過敏反應脫顆粒的即時動態檢測方法
目的:建立即时、动态、直接的肥大细胞脱颗粒光学成像检测方法. 方法:将囊泡表面特异性分子CD63与绿色萤光蛋白(Green Fluorescence Protein,GFP)的基因融合后,通过质粒转染入细胞中,建立稳定表达CD63-GFP蛋白的鼠肥大细胞株(RBL-2H3细胞).之后利用镭射扫描共聚焦显微镜及全内反射显微镜分别观察细胞内囊泡在过敏原刺激下脱颗粒时的运动状况. 结果:成功建立稳定表达CD63-GFP的RBL-2H3细胞株;在类过敏原的刺激下,用镭射扫描共聚焦显微镜观察到了细胞脱颗粒过程中,细胞内囊泡向细胞外脱出的过程,同时,用全内反射显微镜观察到了细胞内囊泡与细胞膜融合的过程. 结论:本研究在活细胞状态下,即时、直观、灵敏、快速地观察到肥大细胞脱颗粒的过程,直接评估过敏原刺激肥大细胞脱颗粒的特性,为类过敏反应的检测提供了新的检测手段.
肥大细胞 类过敏反应 脱颗粒 光学成像检测
胡劍江 侯燕鳴 張倩 雷洪濤 王毅 牛曉紅 王志國 王丹巧
中國中醫科學院醫學實驗中心,北京100700 吉林大學藥學院,長春130021
国内会议
台北
中文
349-359
2011-08-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)