应用创造酶切位点PCR-RFLP检测POT1基因rs1034794位点多态性
目的：建立人端粒保护蛋白1(protection of telomeres1,POT1)多态性(rs1034794)的检测方法. 方法：应用创造酶切位点法(Created Restriction SitePCR,CRS-PCR)根据单碱基突变位点的碱基替代情况设计PCR引物,其中一条引物根据突变位点邻近序列设计,人为引入错配碱基,使得引物3’端和单碱基突变的一种突变型在PCR扩增后形成一个酶切位点,PCR产物用PCR-RFLP(PCR Restriction Fragment Length Polymorphism)法进行分析. 结果：设计一对特异引物,其中正向引物3’末端与多态相邻,倒数第三位碱基为错配碱基A可在PCR扩增后与多态T等位基因及相邻片段形成AGCT结构,使用限制性内切酶AluI酶切效果较好. 结论：应用CRS-PCR方法创造的酶切位点可以有效而简捷地检测POT1(rs1034794)基因多态性.
端粒保护蛋白1 基因多态性 基因检测 创造酶切位点
王思华 王团伟 段晓冉 邓娜 冯晓蕾 王威 吴逸明
河南省职业病防治研究院劳动卫生科,郑州 450052;郑州大学公共卫生学院,郑州 450001 郑州大学公共卫生学院,郑州 450001
国内会议
成都
中文
296-301
2015-04-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）