抗TNF-α单克隆抗体体外生物学活性检测方法的优化及验证
目的:对抗TNF-α单抗体外生物学活性测定方法进行条件优化,并进行方法学验证. 方法:对L929细胞活性测定中不同染色液浓度、细胞密度、放线菌素D及rhTNF-α浓度等条件进行摸索,确定最佳实验条件,并对该方法的精密度、专属性进行验证,并绘制质量控制图. 结果:抗TNF-α单抗可以抑制rhTNF-α对L929细胞的杀伤作用,其反应呈剂量—效应关系.结晶紫染色液、rhTNF-α、细胞密度、放线菌素D最适宜浓度分别为0.2％,1ng/ml,1.5x l05cells/ml及0.8μg/ml.重复性实验结果显示,ED50值的均值为(44.18+6.858)ng/ml,相对标准偏差RSD为15.522％;中间精密度结果显示,不同人员测定的ED50值均值为(41.19±3.05)ng/ml,RSD为7.40％;专属性结果显示,随着抗TNF-α单抗浓度的降低,细胞的存活率随之降低,而其它抗体则无此现象,专属性较好. 结论:已建立的L929细胞测定抗TNF-α单抗方法可用于常规检定.
肿瘤坏死因子-α 单克隆抗体 体外生物学活性 检测技术 临床应用
潘勇兵 张雅婷 张银川 宋桂芝 桂芳 闭兰
武汉生物制品研究所有限责任公司,武汉430207
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2015-11-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）