毕赤酵母组成型启动子PGCW14和PAOXl-PGCW14双启动子在HPV18L1蛋白表达中的应用
目的:探索毕赤酵母组成型启动子PGCW14和PAOX1-PGCW14双启动子在HPV18L1蛋白表达中的应用. 方法:构建重组质粒PGCW14-HPVl8L1和PAOX1-HPV18Ll-PGCW14-HPVl8L1,通过电转获得重组KM71菌株,并用Western blot筛选阳性克隆比较不同启动子类型HPV18L1蛋白的表达量;选取三种型别重组菌株高表达的单克隆进行SL摇瓶培养,每24小时取样,通过Western blot比较不同时间点的表达量差异. 结果:(1)成功构建重组质粒PGCW14-HPVl8L1和PAox1-HPV18Ll-PGCW14-HPVl8L1;(2)筛选得到相应阳性重组KM71菌株;(3)5L摇瓶培养显示PGCW14型别重组菌株的表达量相当甚至高于PAOX1型别重组菌株,双启动子重组菌株的表达量相比于其他两种没有明显优势. 结论:(1)成功利用新型组成型启动子PGCW14和PAOX1-PGCW14双启动子表达HPV18L1蛋白;(2)新型组成型启动子PGCW14提供了一个可以代替PAOX1启动子表达外源蛋白的有效选择,为HPV疫苗的低成本及方便生产提供了一个可供选择的有效方案.
人乳头瘤病毒 PGCW14基因 PAOX1基因 毕赤酵母 基因表达
薛亚慧
上海生物制品研究所有限责任公司
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203-210
2015-11-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）