代谢木糖的酿酒酵母重组菌株的初步构建
在我国,木质纤维素类可再生资源丰富,仅农作物秸杆年产就多达6亿多吨.这些纤维素类资源除部分用于造纸、建筑、纺织等行业外,大部分未能被有效利用,有些还被直接焚烧,造成了严重的环境污染.若能采用适宜的技术将这些废物加以转化利用,不仅能够节粮、代粮,缓解能源紧缺,还可以减少废物、消除公害、保护环境,对我国经济的可持续发展将产生深远的影响.本研究以酿酒酵母BY4741为宿主菌株，以酿酒酵母多拷贝表达载体pYX212为载体，过表达热带假丝酵母木糖代谢途径关键酶：木糖还原酶（XR）、木糖醇脱氢酶（XDH）、木酮糖激酶（XK）、转醛醇酶（TAL）；以及来自大肠杆菌（Escherichia coli）的转氢酶（pntA 和sthA）。实验结果表明，只表达XR和XDH时，酿酒酵母依然无法利用木糖。本研究在过表达XR和XDH的酿酒酵母中继续表达来自热带假丝酵母的TAL，筛选出的阳性转化子能够在以木糖为碳源的平板上生长，且生长能力较强。以不同条件的接种量和发酵培养基碳源种类为考察对象的发酵实验表明，将生长20h的种子液以10％（v/v）的接种量接种的效果比离心收集整瓶种子液的菌体接种的发酵效果好；以葡萄糖、木糖为混合碳源的效果比以木糖为唯一碳源的效果好。实验表明发酵初期的菌体量并非越多越好，初始OD600维持在2左右较适宜。
木质纤维素 木糖发酵 酿酒酵母 转醛醇酶 菌体量
施欣驰 陈勇 邹亚男 应汉杰
南京工业大学,生物与制药工程学院,南京市浦口区浦珠南路30号,211816 南京工业大学,生物与制药工程学院,南京市浦口区浦珠南路30号,211816;南京工业大学,国家生化工程技术研究中心,南京市浦口区浦珠南路30号,211816
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2015-11-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）