腺病毒抗原表位嵌合蛋白构建、表达及其免疫学研究
目的：构建含有人腺病毒3型、7型、11型、14型及55型抗原表位的嵌合蛋白,并对其进行免疫学研究. 方法：利用ANTHEWIN等软件,通过计算机分析人腺病毒3型、7型、11型、14型及55型六邻体蛋白的氨基酸序列,分别筛选出各类型腺病毒六邻体蛋白中具有强抗原性片段.利用基因工程方法将筛选所得蛋白片段的核酸序列进行串联,并将构建所得的重组序列插入载体pET28a(+)中,利用原核表达系统对构建的嵌合蛋白进行表达纯化.将纯化所得的嵌合蛋白作为抗原免疫Balb/c小鼠,制备抗血清.利用ELISA法检测嵌合蛋白的抗原性及免疫原性. 结果：纯化所得的嵌合蛋白浓度达到0.5mg/mL,具有较高的纯度. 结论：经4次免疫,小鼠抗血清效价达到640000,同时ELISA法证明嵌合蛋白具有较好的抗原性及免疫原性.本实验为进一步研制腺病毒疫苗、单克隆抗体以及诊断试剂奠定了基础.
人腺病毒 抗原表位 嵌合蛋白 免疫原性
王新国 齐永 徐亭亭 潘英 李素芹 李佳萌 李素梅 陈晨 徐艺菲 李越希
华东生物医药研究所,南京 210002;中国药科大学生命科学与技术学院,南京 210009 华东生物医药研究所,南京 210002 华东生物医药研究所,南京 210002;南京医科大学基础医学院,南京 210005
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2015-11-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）