会议专题

RNA靶向基因组编辑技术CRISPR/Cas9在昆虫中的研究进展

介绍CRISPR/Cas9系统的基本结构、作用机制、脱靶效应以及在昆虫基因编辑和基因功能研究中的应用,并对该技术可能出现的问题及应用前景进行展望.对CRISPR/Cas9系统进行适当改造,将为基因功能研究提供新的思路和技术手段.Cas9n系统可将Cas9蛋白的第10位氨基酸由D转换为A,使其只切割靶位点的单链,Cas9n可在每个sgRNA结合点造成单链切口,2个相邻的单链切口则形成1个DNA双链断裂,如此就能实现NHEJ介导的基因编辑,这大大提高了CRISPR/Cas9系统的特异性,并降低其脱靶效率.而dCas9系统将Cas9蛋白失活,通过偶联不同的辅助功能蛋白,如FokI等,可实现更为精确的基因组切割和编辑,若为转录激活域(VPl6或VP64),则可在体内对靶基因进行激活.这些具有基因编辑、基因激活、抑制以及调控功能的CRISPR/Cas9家族成员,将为未来基因功能研究、调控、害虫防治乃至基因治疗等方面提供新型技术手段和研究思路.

昆虫 基因组编辑系统 核糖核酸 脱靶效率

张婷婷 柳伟伟 李涛 张敏 张学尧 马恩波 张建珍

山西大学 应用生物学研究所,太原030006 山西大学 应用生物学研究所,太原030006;山西大学 生命科学学院,太原030006

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2015-07-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)