青蛤(Cyclina sinensis)亲环素A基因的克隆与鳗弧菌刺激后的表达分析
青蛤(Cyclina sinensis)是我国沿海常见的经济贝类.为推动国内青蛤养殖产业的可持续健康发展，开展对青蛤免疫抗病害机制方面的研究显得尤为重要．采用SMART-cDNA文库和高通量测序方法,筛选出青蛤亲环素A基因(CypA)的全长cDNA.采用荧光定量PCR法分析该基因在鳗弧茵刺激后的表达情况,并对青蛤CypA基因进行原核表达与蛋白纯化.结果表明,青蛤CypA基因全长共962bp,其中5’UTR为87bp,37UTR为346bp,开放阅读框长度为495bp,可以编码164个氨基酸,理论相对分子质量约为19.39kDa,等电点约为5.25.在菌液侵染刺激条件下,刺激3h后表达量即达到峰值,随后表达量逐渐降为正常水平.本研究成功表达了重组CypA蛋白,并运用镍离子交换柱法分离纯化出该蛋白,其相对分子质量约为19kDa.
青蛤养殖 抗病害机制 亲环素A基因 鳗弧茵刺激 基因表达
张海静 魏星 潘宝平
天津师范大学 生命科学学院,天津300387;天津师范大学 天津市动植物抗性重点实验室,天津300387
国内会议
天津
中文
80-83,95
2015-07-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）