前列腺癌快速免疫诊断技术的前期研究
目的:构建前列腺干细胞抗原(PSCA)单链抗体与碱性磷酸酶(AP)的融合表达载体,并进行原核表达和鉴定. 方法:根据大肠杆菌的密码子偏爱性进行碱基优化,合成抗PSCA的单链抗体基因PaFv基因,用Sfi Ⅰ和Not Ⅰ限制性核酸内切酶分别酶切、连接至含有AP编码序列的pDAP2/S载体上,转化大肠杆菌XL1-Blue中诱导表达,Western blot检测融合蛋白的表达情况,并测定融合蛋白活性. 结果:PCR鉴定和序列测定显示抗PSCA单链抗体基因成功构建到pDAP2/S载体中,分析结果表明单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白在重组大肠杆菌中表达形式为包涵体,具有融合蛋白的活性. 结论:成功构建并表达了抗PSCA单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白,为进一步发展以PSCA为靶点的前列腺癌快速免疫诊断方法奠定了基础.
前列腺癌 免疫诊断 前列腺干细胞抗原 单链抗体 碱性磷酸酶 融合蛋白
黄顺莉 喻艳琴 夏雪 黄江涛 冯敏 王婷婷
贵州医科大学生物与工程学院,贵州省 贵阳市 550025
国内会议
哈尔滨
中文
741-745
2015-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）