北葶苈子HDS基因的克隆、序列分析与原核表达载体构建

摘要：

目的:获得北葶苈子(Lepidiumapetalum)中1-羟基-2-甲基-2-(E)-丁烯基-4-二磷酸合酶(1-hydroxy-2-methyl-2-(E)-butenyl-4-diphosphate synthase,HDS)的编码基因,进行生物信息学分析,并构建该基因的原核表达载体. 方法:根据北葶苈子转录组测序结果中的HDS基因序列,设计特异性引物,通过PCR扩增得到北葶苈子HDS的cDNA序列,进行TA克隆、测序及序列分析,并构建原核表达载体. 结果:得到北葶苈子HDS cDNA全长2226bp,编码741个氨基酸;序列分析表明北葶苈子HDS基因编码的氨基酸序列包含1-羟基-2-甲基-2-(E)-丁烯基-4-二磷酸合酶结构域,氨基酸序列进化关系表明北葶苈子HDS与拟南芥(Arabidopsis thaliana)亲缘关系最近;成功构建了pET-32a-LaHDS原核表达载体. 结论:首次克隆得到北葶苈子HDS基因,并构建了该基因的原核表达载体,为原核表达、纯化蛋白并研究其结构和功能奠定了基础.

关键词： 北葶苈子 HDS基因 基因克隆 基因序列 原核表达载体

作者: 马利刚 郑晓珂 赵乐 韩永光

作者单位: 河南中医学院药学院 郑州 450046;呼吸疾病诊疗与新药研发河南省协同创新中心 郑州 450046 河南中医学院药学院 郑州 450046

会议类型: 国内会议

会议名称: 2015全国中医药生物化学与分子生物学年会

会议地点: 兰州

会议语种:中文

页码: 103-108

在线出版日期: 2015-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）