MLL2在B细胞淋巴瘤中的表达以及调控机制的研究
目的：讨论混合谱系白血病2(MLL2)基因在B细胞淋巴瘤中的表达趋势及其在淋巴瘤发生、发展中的作用. 方法：随机收集2008年至今年我院所收治并经病理证实的B细胞淋巴瘤患者病理切片33例,其中惰性淋巴瘤——滤泡细胞淋巴瘤(FL)18例、侵袭性淋巴瘤——弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)15例;收集反应性增生淋巴结(RHL)4例作为对照.应用MLL2抗体行免疫组织化学染色,观察MLL2蛋白在三组不同病理切片中表达的强弱趋势及位置差别,并利用免疫反应积分(IRS)法评价免疫组化结果,从而进一步量化三组间MLL2蛋白的表达状况.利用Western blot技术检测MLL2在弥漫大B细胞淋巴瘤细胞株(DOHH-2)中的表达,以人胚肾细胞株(HEK293)中MLL2的表达作为正常组织对照.采用RT-PCR方法检测MLL2mRNA在DOHH-2及HEK293细胞株中的表达,比较恶性B细胞淋巴瘤与对照细胞株中MLL2的表达趋势.运用脂质体转染技术将MLL2siRNA转染DOHH-2细胞株,抑制MLL2mRNA的表达,RT-PCR方法检测转染前后VEGF mRNA、β-catenin mRNA的表达变化.流式细胞术检测MLL2siRNA转染后DOHH-2细胞的调亡、细胞周期变化,进而探讨MLL2对B细胞淋巴瘤生长的影响. 结果：免疫组化结果表明,B细胞淋巴瘤的病理切片中,本应在细胞核内表达的MLL2蛋白,在细胞核外表达增多.随着肿瘤恶性度的增加弥漫大B细胞淋巴瘤中检测到的MLL2蛋白量以及MLL2蛋白核外表达现象明显多于滤泡淋巴瘤和反应性增生淋巴结,且染色强度逐渐加深.所有病理切片中,血管内皮细胞及平滑肌细胞均见染色.RT-PCR及Western blot方法均可以在DOHH-2细胞株中检测到MLL2的表达,且MLL2siRNA转染后可检测到MLL2mRNA表达水平显著下降.MLL2siRNA转染后,诱导淋巴瘤细胞凋亡,并使细胞周期停滞于G0/G1期.MLL2siRNA转染后,VEGF mRNA、β-catenin mRNA的表达明显下降. 结论：MLL2蛋白可能在B细胞淋巴瘤的发生、发展过程中起一定促进作用.MLL2蛋白的表达可能与B细胞淋巴瘤的恶性程度成正相关.MLL2可能促进血管的生成,并且其促血管生成作用是通过与VEGF相互影响达到的.MLL2蛋白有抗调亡作用并且可以促进肿瘤细胞的生长.
B细胞淋巴瘤 混合谱系白血病2基因 基因表达 病理机制
刘北辰
河北医科大学附属第四医院
国内会议
第八届中国肿瘤内科大会、第三届中国肿瘤医师大会暨中国抗癌协会肿瘤临床化疗专业委员会2014年学术年会
北京
中文
581-581
2014-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）