KIR2DS1受体介导人NK细胞对白血病细胞杀伤作用研究
目的：本实验研究活化性杀伤细胞免疫球蛋白样受体KIR2DS1对自然杀伤细胞杀伤活性的影响;检测表达KIR2DS1基因的NK细胞对不同白血病细胞(携带不同HLA-Cw抗原)杀伤作用的差异,以初步了解KIR/配体与NK细胞毒活性的相关性,为临床上异基因造血干细胞移植选择合适的供者以增强移植后移植物抗白血病效应提供依据. 方法：1.PCR-SSP法和PCR-SBT法分别检测KIR基因和HLA-Cw基因.2.根据KIR和HLA-Cw基因的检测结果进行分组：①根据HLA-Cw基因将健康供者及AML患者分为C1、C2、C1/C2组.②根据是否表达KIR2DS1基因将健康供者NK细胞分KIR2DS1阳性组和KIR2DS1阴性组.3．分选NK细胞，采用NK富集试剂盒分选NK细胞。4．NK细胞培养。5．采集白血病细胞。6．封闭KIR2DS1基因：采用抗-KIR2DS1单克隆抗体封闭KIR2DS1基因，检测封闭前后NK细胞杀伤活性差异。7．NK细胞毒作用检测：采用CCK-8(cell counting kit-8)比色法，检测NK细胞对K562细胞、白血病细胞的杀伤作用差异。 结果：1．NK细胞通过富集试剂盒富集后，分选后CD3-/CD56、细胞含量为(91.2±5.94)％。2．纯化的NK细胞实验组扩增倍数显著高于空白对照组（P<0.05）。3．AML患者新鲜骨髓液分离的单个核细胞，经流式细胞仪检测，测得白血病细胞比例大于90%。4．与对照组（未加入刺激因子）比较，刺激因子组对K562细胞的杀伤率比未加刺激因子组杀伤率明显增高（P<0.05）。5．效靶比分别为5:1、10：1、20：1时，KIR2DS1阳性组NK细胞加入封闭抗体后，分别较封闭前明显减低（P<0.05）。6．效靶比为5:1时，实验组NK细胞对K562细胞的杀伤率较空白对照组明显增高（P<0.05）；不同效靶比下，KIR2DS1阳性NK细胞对靶细胞的杀伤率分别高于KIR2DS1阴性NK细胞对白血病细胞的杀伤率（P<0.05）。C1组KIR2DS1阳性NK细胞对C2组靶细胞的杀伤率%高于C1组和C1/C2组靶细胞，（P<0.05）。 结论：1．活化性KIR2DS1受体可介导NK细胞发挥异源反应性，杀伤白血病细胞，增强GVL效应。2．表达HLA-C1分子的KIR2DS1阳性NK细胞对表达HLA-C2分子的白血病细胞的杀伤作用强，选择合适的KIR/HLA-Cw供者有利于受者移植后GVL效应的增强。
白血病 自然杀伤细胞 KIR2DS1受体 细胞杀伤作用
王静 苏丽萍
山西医科大学研究生学院 山西医科大学附属肿瘤医院
国内会议
第八届中国肿瘤内科大会、第三届中国肿瘤医师大会暨中国抗癌协会肿瘤临床化疗专业委员会2014年学术年会
北京
中文
616-616
2014-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）