洋桔梗EgFT基因的载体构建和表达分析
本研究根据NCBI上已报道的洋桔梗FT基因的cDNA序列设计引物,并引入合适的酶切位点,从洋桔梗”德拉迷斯”cDNA中克隆得到541bp的ORF序列和394bp的干涉片段.通过酶切连接技术,将EgFT基因的ORF序列正向插入到中间表达载体pCAMBIA2300s中,获得了含有CaMV35S启动子和卡那霉素抗性基因的正义表达载体pC2300s-EgFT;通过同源重组法(BP反应),将EgFT基因的片段整合进入载体pHellsgate2中,形成含有intron的反向重复序列,获得了含有CaMV35S启动子、卡那霉素和壮观霉素抗性基因的干涉表达载体pHellsgate2-EgFT.通过RT-PCR分析,发现EgFT基因在花芽中的表达量最高,其次是成熟叶片、幼叶和茎,在萼片和花瓣中有微弱的表达,雄蕊和雌蕊中表达量极低或不表达.
洋桔梗 抗性基因 基因载体 基因表达
王琴 张春燕 胡惠蓉
华中农业大学教育部园艺植物生物学重点实验室,华中农业大学园艺林学学院,武汉430070
国内会议
郑州
中文
173-179
2013-08-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）